Uncategorized
فعالية البكتريا Lactobacillus rhamnosus في إنتاج فيتامين B12 و المعزولة من منتجات الألبان المحلية و استعماله لمعالجة فقر الدم في الحيوانات المختبرية
فعالية البكتريا Lactobacillus rhamnosus في إنتاج فيتامين B12 و المعزولة من منتجات الألبان المحلية و استعماله لمعالجة فقر الدم في الحيوانات المختبرية
 |
| فعالية البكتريا Lactobacillus rhamnosus في إنتاج فيتامين B12 و المعزولة من منتجات الألبان المحلية و استعماله لمعالجة فقر الدم في الحيوانات المختبرية
المستخلص Summary
أجريت الدراسة الحالية في جامعة الكوفة للمدة من 2021/10 الى 2022/7 ) و تضمنت الدراسة اختبار قدرة بعض البكتريا لإنتاج فيتامين B وتحديد العزلات الأكفا للإنتاج و إستعمالها لمعالجة فقر الدم في الحيوانات المختبرية واظهرت النتائج ما يأتي:
إذ تم عزل 8 أنواع بكتيرية تعود للجنس Lactobacillus من مصادر غذائية كالحليب الخام واللبن الرائب والأجبان المحلية ، فضلاً عن ذلك تم الحصول على عدد من العزلات المشخصة من مختبرات مركز الأمين للتقانات الأحيائية تمثلت في ( Streptococcus thermophilus Bacillus cogulance, Bacillus clussi, Bacillus subtils, .Bifidobacterium spp) أظهرت النتائج أن لجميع العزلات البكتيرية القابلية على انتاج فيتامين B12 عند تنميتها على وسط الاختبار B assay medium وخضعت جميع العزلات العملية غربلة لتحديد الأكفأ منها في إنتاج فيتامين B12 تحت ظروف نمو مختلفة و بينت النتائج أن العزلة Lactobacillus rhamnosus هي الأكفأ في انتاج الفيتامين.
اختبرت قابلية كل العزلات المدروسة على إنتاج فيتامين B12 باستعمال اوساط مختلفة شملت 3 أوساط زرعية حسب نوع العزلة البكتيرية ( MRS broth و Brain heart و حليب خالي الدسم ) وأظهرت النتائج أن اعلى انتاج للفيتامين كان باستخدام وسط MRS للعزلة Lactobacillus rhamnosus إذ بلغت كميته 308.460 ميكروغرام / لتر
من جانب آخر حددت الظروف الزرعية المثلى لإنتاج فيتامين B12 بواسطة بكتريا Lrhamnosus إذ تم اختبار قدرتها على انتاج فيتامين B12 تحت ظروف مختلفة، إذ أشارت النتائج إلى أن الرقم الهيدروجيني 7 هو الأمثل لإنتاج فيتامين B12 من قبل بكتريا Lrhamnosus ، وجد أن درجة حرارة الحضن المثلى لإنتاج فيتامين B12 هي 30 م، فيما يتعلق بتأثير مدة الحضن على إنتاج فيتامين B12 لوحظ أن مدة 3 أيام هي الأفضل في انتاج الفيتامين و بينت النتائج أن إضافة أقل تركيز من كلوريد الكوبالت أعطى انتاجية عالية من الفيتامين بالمقارنة مع التراكيز الأعلى المضافة، فضلاً عن ذلك أن أفضل مصدر كربوني هو السكروز Sucrose من بين ثلاث مصادر كربونية شملت الكلوكوز والفركتوز و السكروز، وأظهرت نتائج الدراسة ان افضل مصدر نيتروجيني هو البيتون Peptone بالمقارنة مع مستخلص الخميرة إذ اعطى اعلى انتاج من فيتامين B12.
اختبرت فعالية فيتامين B12 المستخلص على الحيوانات المختبرية بتركيز 2 و 4 ميكروغرام مل والمصابة بالأنيميا ومقارنته بفيتامين B التجاري إذ لوحظ ارتفاع معنوي في عدد كريات الدم الحمر RBC مقارنة مع معاملة السيطرة للحيوانات المصابة بفقر الدم control
لوحظ عند معاملة الحيوانات المختبرية بمستخلص (B12 بتركيز (2) (4) ميكروغرام مل الأثر الإيجابي برفع معنوي لمعدل تركيز الهيموغلوبين HGB الى 13.48 ، 15.2) غم 100 مل على التوالي مقارنة مع معاملة السيطرة control إذ كانت (119) غم 100 مل فضلاً عن ذلك ارتفع الهيموغلوبين HGB عند حقن الحيوانات بفيتامين B التجاري (12.113.75) غم 100 مل للتركيزين 4.2 ميكروغرام مل على التوالي مقارنة مع معاملتي السيطرة.
أما عدد كريات الدم البيض WBC لوحظ ارتفاع معنوي مقارنة مع معاملة السيطرة control بينما لوحظ انخفاض معدل الصفيحات الدموية PLT معنوياً الى 325 ميكرولتر 103 مقارنة مع معاملة السيطرة control إذ كانت 346 ميكرولتر / 103 أما عند حقن الحيوانات بمستخلص فيتامين B12 فقد ارتفعت PLT معنوياً الى (334.5 387.5) ميكرولتر / 10 للتركيزين (4.2) ميكروغرام مل على التوالي فضلاً عن ذلك ارتفع معدل الصفيحات الدموية عند المعاملة بـ B12 التجاري للتركيزين 4.2 ميكروغرام مل 1334.7331.2) ميكرولتر / 10 على التوالي مقارنة مع معاملة السيطرة control.
من جانب آخر أختبرت قابلية تأثير فيتامين B12 على فعالية أنزيمات الكبد إذ أوضحت النتائج إنخفاض أنزيم ALT و أنزيم AST لكل المجاميع مقارنة مع معاملة السيطرة RATI والتي تمثل الحيوانات المختبرية غير المصابة بالأنيميا أما الكوليسترول TC فقد انخفضت نسبته ونسبة الدهون الثلاثية TG و نسبة البروتينات واطئة الكثافة LDL أما البروتينات عالية الكثافة
HDL فقد ارتفعت بالمقارنة مع معاملة السيطرة RATI .
من جهة أخرى أظهرت نتائج الزراعة النسيجية للأعضاء ( الكبد والطحال المأخوذة من الحيوانات المختبرية عدم حصول تغيرات مرضية نسيجية واضحة مقارنة مع معاملة السيطرة أما الكلية فقد لوحظ احتقان بسيط بالأنسجة و عدم وجود تغيرات نسيجية واضحة مقارنة مع
معاملة السيطرة.
المقدمة. Introduction
الفيتامينات vitamins مركبات عضوية ضرورية وهي من العناصر الغذائية الاساسية التي يجب توافرها للجسم بكميات محددة وهي تعمل لتنظيم أداء بعض الوظائف الكيميائية و الفسيولوجية المختلفة في جسم الانسان و تعمل بشكل عوامل مساعدة Cofactor لبعض التفاعلات الكيميائية وتعمل على تنظيم عمليات التمثيل الغذائي و لكنها لا توفر الطاقة أو تعمل كوحدات بناء وأكتشفت منذ ما يقارب 80 عاماً و تسمى anti-permicious animem إذ تكون الفيتامينات اساسية وتستعمل على نطاق واسع في الصناعات الطبية والغذائية و يعتمد انتاجها طبيعيا على طريقة تغذية الجسم وهي موجودة في المواد الغذائية سواء كانت نباتية أم حيوانية (Capone and Sentongo.,2019)
اما اذا كانت منتجة من الاحياء المجهرية بشكل طبيعي أو صناعي فهو يعتمد على نوع
الميكروب و سلالته ونوع المادة الغذائية النامي عليها الميكروب وطريقة التخمر ويعتمد ايضا على نوع المتطلبات الاساسية له الزيادة انتاجه و تشمل المصدر الكربوني، المصدر النيتروجيني
pH ، درجة الحرارة وغيرها من المصادر المهمة للإنتاجية 2017,.Fang et al).
صنفت الفيتامينات على اساس قابليتها على الذوبان في الماء أو الدهون و لكل مجموعة خصائص تميزها عن المجموعة الأخرى إذ أن مجموعة فيتامين B و C تذوب بسهولة في الماء و يتم امتصاصها مباشرة في الدم و تطرح من الجسم بسرعة (Gropper and Smith., 2013)
اما مجموعة فيتامينات .E,D.A فهي ذائبة في الدهون ويرتبط امتصاصها بامتصاص
الدهون وتبقى في الجسم لمدة أطول الأمر الذي يشكل خطرا على الصحة في حال استهلاكها بشكل كبير اذ من الممكن تضاعف احتمالية الاصابة بالسمية عند تناول هذه الفيتامينات مقارنة
بأثر الجرعات الزائدة من الفيتامينات الذائبة في الماء.
ولكل فيتامين وظائف معينة في الجسم و اي نقص فيه يؤدي الى ظهور اعراض مميزة وقد تظهر اعراضه خلال مدة قصيرة أو لمدة طويلة و قد يعود ذلك لعدم تناول كميات كافية من مصادر الفيتامين أو نتيجة الاصابة بأمراض معينة تمنع الامتصاص الصحيح أو الكامل للفيتامين وهذا يتم تحت اشراف الاطباء اذ احيانا الافراط في استعمالها يسبب اعراض جانبية في الجسم (Antonio et al., 2020)
تعد مجموعة فيتامين B من المجموعات الكبيرة والمتنوعة وتختلف أعراض نقصها من شخص لآخر ولكل واحد منها وظيفة محددة الا انها تتعاون لتؤدي وظائف متمثلة بالحفاظ على صحة الاعضاء في الجسم كالجهاز العصبي وانتاج كريات الدم الحمراء وصحة خلايا الجسم بشكل عام لدورها في انتاج DNA وتأثيرها على الجهاز المناعي بشكل عام و تكون هذه B1 B2 B3, B5, B6 B7 BB المجموعة متنوعة ومعقدة وتتألف من (Antonio et al., 2020)
بعد فيتامين B12 من مجموعة فيتامين B وهو من الفيتامينات الذائبة في الماء و يكون من اصل حيواني اذ تم عزله عام 1948 لأول مرة من عصير الكبد عند إستعماله لعلاج فقر الدم الخبيث و يتواجد تقريبا فقط في المنتجات الحيوانية والاغذية المتخمرة ميكروبيا ولا يمكن إنتاجه صناعياً الا من خلال التخمير البكتيري في اثناء التصنيع (2020 Gianluca and Antonio)
يمثل إنتاج فيتامين B12 بالطرق الكيميائية تحديا كبيرا من الناحية الكمية وكذلك ارتفاع التكلفة من جهة الانتاج التجاري بينما عمليات التخمير الميكروبي تكون قليلة التكلفة و العمر الخزني اطول و النكهة المحسنة اثناء التخمير و تعد سلالات بكتريا Lactobacillus فعالة وقادرة على انتاج B12 و تفضل مع عدد من البكتريا لأكثر من 20 جنس في الانتاج الصناعي بسبب انتاجيتها العالية وسهولة نموها و عزلها.
و نظرا لقلة الدراسات حول انتاج و إستخلاص فيتامين B12 من الكائنات المجهرية هدفت الدراسة الى:
.1 عزل و تشخيص بعض أجناس بكتريا Lactobacillus من مصادر غذائية متنوعة وشملت الحليب ومنتجاته
2 اختبار قدرة البكتريا المعزولة على انتاج فيتامين B12 و تحديد البكتريا الأكفأ لإنتاجه.
3 استخلاص فيتامين B12 من البكتريا المنتجة لهذا الفيتامين.
4 دراسة الظروف المثلى لإنتاج فيتامين B12 من بكتريا Lrhamnosus .
5 اختبار قدرة فيتامين B12 المستخلص و المنقى على معالجة فقر الدم في الحيوانات المختبرية المصابة بالأنيميا ومقارنته مع B12 التجاري.
|
